培養皿使用方法：
本產品適用的細胞系包括但不限于：人臍帶來源的間充質干細胞、人脂肪來源的間充質干細胞、人骨髓來源的間充質干細胞、人來源的皮膚成纖維細胞。但使用本產品制備本說明規定以外的其他細胞系的細胞薄膜，其體外培養條件以及所使用培養基需要相應做出調整，建議客戶在使用本產品時應特別注意。
客戶在購買并收到產品后，請檢查無菌外包裝是否破損，培養皿結構是否出現破碎或者裂痕，是否存在目檢可見的污染物等，若存在上述問題請勿繼續使用本產品。
由于實驗所用試劑、操作環境以及操作手法的差異，下列方法僅供客戶參考，以人臍帶來源的間充質干細胞為例：
1. 細胞接種
(1）本例中所使用的人臍帶來源的間充質干細胞的最佳培養代數為7代及以下。對于人臍帶來源的間充質干細胞，本說明推薦使用的完全培養基為Takara Cellartis人間充質干細胞培養基（Xeno-Free級別，Cat.No Y50200），并加入抗壞血酸至濃度為50μmol/L。取本產品按照表-1所建議的細胞密度進行接種。將培養皿放入37℃、5%二氧化碳、濕度飽和的細胞培養箱中培養。
規格 | 培養面積（cm2） | 接種密度（個） | 培養基用量（毫升） |
PCCD35mm | 8.8 | 0.2 x 106 | 1.5 |
PCCD60mm | 21.5 | 0.5 x 106 | 4.0 |
PCCD100mm | 56.7 | 1.0 x 106 | 10.0 |
(2）定期觀察細胞生長狀態，待細胞生長至過飽和狀態后（100%融合度），可用于進行下一步操作。
2. 細胞薄膜的分離和提取
(1）吸出培養皿中的培養基，取等量D-PBS緩緩加入培養皿中洗除殘留培養基。
(2）從邊緣緩緩吸出D-PBS，取出一片符合培養皿大小的支撐物（此處插入貨號）并小心地將其放入培養皿中。在放入過程中應避免支撐物與細胞薄膜表面發生摩擦，從而破壞細胞薄膜的完整性。
(3）向支撐物的表面緩慢滴加D-PBS，在浸潤支撐物的同時使得D-PBS完全覆蓋培養皿表面。
(4）室溫下靜置孵育20分鐘（注意，不同細胞系細胞薄膜所需的孵育時間可能不同，需要根據具體細胞系進行優化。
(5）孵育完成后，以潔凈鑷子夾起支撐物邊緣，將支撐物連同細胞薄膜一起揭下。即可看到貼附于支撐物的細胞薄膜。
(6）將細胞薄膜連同支撐物轉移至移植處表面，如損傷皮膚、器官、或潔凈培養皿表面，以0.9%氯化鈉注射液緩緩沖洗支撐物的無細胞面，促進細胞薄膜和支撐物的分離。待細胞薄膜與支撐物分離并貼附于目標移植處表面，移除支撐物。
注意事項
(1) 在整個細胞培養以及操作過程中，請注意保持無菌操作。
(2) 本說明所推薦的細胞使用代數為7代以及以下。
(3) 為達到最佳的成膜以及脫膜效果，培養細胞所用培養基中應適當加入抗壞血酸至濃度為16-60μmol/L。
